水中葉綠素a的測定方法

葉綠素是植物光合作用中的重要光合色素，通過測定浮遊植物葉綠素，可掌握水體(ti) 的初級生產(chan) 力情況。浮遊藻類裏常見的葉綠素有a、b、c、d四種類型，其中，葉綠素a在一切浮遊藻類裏大約占有機物幹質量的1%~2%，是環境監測中表征浮遊植物生物量最常用的指標之一，所以常被用於(yu) 研究地表水環境的富營養(yang) 化。那水中葉綠素a含量一般是多少呢？水體(ti) 富營養(yang) 化一般采用的指標是：氮含量超過0.0.3 mg/L，磷含量大於(yu) 0.01～0.02mg/L，BOD大於(yu) 10mg/L，pH值7～9的淡水中細菌總數超過10萬(wan) 個(ge) ／毫升，葉綠素a含量大於(yu) 10ug/L。

水質葉綠素a的測定方法有分光光度法、熒光光譜法、色譜法和遙感監測等方法，其中，分光光度法和熒光光譜法應用最為(wei) 廣泛。下麵小編來具體(ti) 介紹一下。

1、分光光度法

分光光度法屬於(yu) 光度法的一種，該分析方法采用的原理是物質分子對光具有選擇吸收的特性。葉綠素a的最大吸收峰位於(yu) 663nm，在一定濃度範圍內(nei) ，其吸光度與(yu) 濃度符合朗伯-比爾定律，可根據吸光度-濃度之間的線性關(guan) 係，計算葉綠素a的濃度。

2、熒光光譜法

葉綠素分子被紫外光照射後可發射出特征紅色熒光，其熒光強度與(yu) 葉綠素濃度呈正比，據此可釆用熒光法進行葉綠素a的定量分析。普通萃取熒光法的操作步驟主要為(wei) 標準溶液的配製、標準曲線的製定和樣品熒光強度的測定。將提取的新鮮綠色植物液中的葉綠素作為(wei) 儲(chu) 備液，用分光光度法標定其濃度：將標準儲(chu) 備液稀釋配製成標準係列，用熒光光度計測定標準係列的熒光強度，繪製葉綠素a標準曲線；由樣品測得的熒光強度從(cong) 葉綠素a標準曲線上查得相應濃度。

3、色譜法

高效液相色譜(HPLC)法是一種廣泛應用於(yu) 化學、醫藥、生命科學等領域的分析手段。使用高效液相色譜法測定葉綠素a時，需要破壞測定藻類的原樣，前處理方法與(yu) 分光光度法的前處理方法相似。

4、遙感監測

水質遙感監測是通過監測一定波長範圍內(nei) 的水體(ti) 輻射值，定量分析水體(ti) 反射光譜特征與(yu) 水質指標間的關(guan) 係，進而構建水質指標反演算法的一類方法體(ti) 係。遙感技術測定葉綠素a近年來已經被國內(nei) 外許多學者證實具有監測範圍廣、速度快、成本低和便於(yu) 進行長期動態監測的優(you) 勢。