水質葉綠素a的測定方法

葉綠素是植物光合作用中的重要光合色素，通過測定浮遊植物葉綠素，可掌握水體(ti) 的初級生產(chan) 力情況。浮遊藻類裏常見的葉綠素有a、b、c、d四種類型，其中，葉綠素a在一切浮遊藻類裏大約占有機物幹質量的1%~2%，是環境監測中表征浮遊植物生物量最常用的指標之一，所以常被用於(yu) 研究地表水環境的富營養(yang) 化。同時，葉綠素a也被用來評價(jia) 水體(ti) 富營養(yang) 化水平，以及衡量水體(ti) 水質。下麵我們(men) 來看一下水質葉綠素a的測定方法有哪些。

1、分光光度法

分光光度法屬於(yu) 光度法的一種，該分析方法采用的原理是物質分子對光具有選擇吸收的特性。葉綠素a的最大吸收峰位於(yu) 663nm，在一定濃度範圍內(nei) ，其吸光度與(yu) 濃度符合朗伯-比爾定律，可根據吸光度-濃度之間的線性關(guan) 係，計算葉綠素a的濃度。

2、熒光光譜法

葉綠素分子被紫外光照射後可發射出特征紅色熒光，其熒光強度與(yu) 葉綠素濃度呈正比，據此可釆用熒光法進行葉綠素a的定量分析。普通萃取熒光法的操作步驟主要為(wei) 標準溶液的配製、標準曲線的製定和樣品熒光強度的測定。將提取的新鮮綠色植物液中的葉綠素作為(wei) 儲(chu) 備液，用分光光度法標定其濃度：將標準儲(chu) 備液稀釋配製成標準係列，用熒光光度計測定標準係列的熒光強度，繪製葉綠素a標準曲線；由樣品測得的熒光強度從(cong) 葉綠素a標準曲線上查得相應濃度。

3、色譜法

高效液相色譜(HPLC)法是一種廣泛應用於(yu) 化學、醫藥、生命科學等領域的分析手段。使用高效液相色譜法測定葉綠素a時，需要破壞測定藻類的原樣，前處理方法與(yu) 分光光度法的前處理方法相似。

4、遙感監測

水質遙感監測是通過監測一定波長範圍內(nei) 的水體(ti) 輻射值，定量分析水體(ti) 反射光譜特征與(yu) 水質指標間的關(guan) 係，進而構建水質指標反演算法的一類方法體(ti) 係。遙感技術測定葉綠素a近年來已經被國內(nei) 外許多學者證實具有監測範圍廣、速度快、成本低和便於(yu) 進行長期動態監測的優(you) 勢。

5、pH值法

pH值法是研究水域生態係統初級生產(chan) 量的又一種方法。該方法測定原理主要是依據初級生產(chan) 量與(yu) 溶於(yu) 水中的二氧化碳有定的關(guan) 係，即水體(ti) 中的pH值是隨著光合作用中吸收二氧化碳和呼吸過程中釋放二氧化碳而發生變化的。使用pH電極連續記錄水體(ti) 的pH值變化，由此分析光合量和呼吸量，從(cong) 而來估計初級生產(chan) 力。

葉綠素a的測定方法有分光光度法、熒光光譜法、色譜法和遙感監測等方法，其中，分光光度法和熒光光譜法應用最為(wei) 廣泛。其實對於(yu) 水質葉綠素a監測方法的選取，應根據實際情況進行選擇，綜合考慮多種因素，如研究目的、對樣品前處理精度要求、樣品種類的要求、儀(yi) 器靈敏度要求、儀(yi) 器成本等。