四種葉綠素測定方法簡析

葉綠素含量是植物生長環節中的重要生理指標。由於(yu) 它對周圍環境非常敏感，與(yu) 植物的光合作用和養(yang) 分吸收密切相關(guan) ，因此被廣泛用作植物生長的常規測量指標項目。葉綠素含量的測定方法有很多，國際上普遍采用傳(chuan) 統的Arnon法（又稱研磨法）。但這種方法需要將植物材料研磨後進行轉移、過濾或離心處理，不僅(jin) 工作量大，而且不可避免地使檢測人員長時間接觸空氣中揮發的試劑，對人體(ti) 危害較大。近年來，直接浸取法受到重視，用不同比例的混合液提取葉綠素，證明了混合液提取的可行性，對傳(chuan) 統的Arnon法進行了改進，將樣品冷凍處理後，用50℃丙酮靜置萃取計量，大大提高了工作效率。

(1)研磨法：稱取0.5g試樣於(yu) 研缽中，加入少量CaCO3和5mL 80%丙酮，充分研磨至白色（約5min），轉移至10mL帶塞離心管中，定容至刻度，搖勻後置於(yu) 4℃冰箱中12 h，離心10 min（2000 r/min），取上清液測定。

(2)直接浸取法：稱取試樣0.5g於(yu) 10mL帶塞離心管中，用80%丙酮定容至刻度，於(yu) 暗櫃中靜置72h浸取，取上清液測定。

(3)樣品冷凍後50℃提取液提煉法：稱取0.5g樣品於(yu) 10mL帶塞離心管中，放入冰箱冷凍2小時，取出後加入10mL在水浴鍋中加熱至50℃的80%丙酮。充分搖勻後，在暗櫃中靜置4h，取上清液測定。

(4) 葉綠素檢測儀(yi) ：葉綠素檢測儀(yi) 是所有方法中zui快的。您隻需手持葉綠素檢測儀(yi) ，將葉片插入儀(yi) 器的感應部位，然後關(guan) 閉測量探頭即可。用於(yu) 此測量的儀(yi) 器也稱為(wei) 便攜式葉綠素檢測儀(yi) ，因為(wei) 葉綠素檢測儀(yi) 機身小巧，可以輕鬆攜帶到野外進行測量。

在上述測定方法中，直接浸取法提取效果zui好，但耗時較長，傳(chuan) 統研磨法葉綠素的損失較大，冷凍後用50℃提取液提煉法操作簡便且提煉速度較快，在提煉率和穩定性方麵均顯示良好的優(you) 越性。冷凍後用50℃提取液提煉法的比較好的試驗條件為(wei) 將試驗材料冷凍1h後，靜置提煉3h。與(yu) 其他三種化學方法相比，葉綠素檢測儀(yi) 更快、更方便。而且，用葉綠素檢測儀(yi) 測量葉綠素含量時，不會(hui) 對葉片造成傷(shang) 害，這也是使用葉綠素檢測儀(yi) 的另一大優(you) 勢。因為(wei) 不需要摘葉，可以直接用儀(yi) 器夾住葉子進行測量，這樣就可以在作物生長的全過程中對具體(ti) 的葉子進行監測，進而獲得更科學的分析結果。