葉綠素a測定儀的使用方法

目前我國內(nei) 陸自然水體(ti) 的富營養(yang) 化日益嚴(yan) 重，導致水體(ti) 中的藻類物質大量繁殖，由於(yu) 藻類物質中含有葉綠素a，含量較為(wei) 穩定，並且易於(yu) 人工測定，因此可以通過使用水質葉綠素a測定儀(yi) 檢測水中浮遊植物葉綠素a的含量，掌握水體(ti) 的初級生產(chan) 力情況和富營養(yang) 化水平。

葉綠素a測定儀(yi) 的原理

將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮溶液提取葉綠素，離心分離後分別於(yu) 750nm、664nm、647nm和630nm波長處測定提取液吸光度，根據公式計算水中葉綠素a的濃度，可以廣泛適用於(yu) 海洋監測、自來水、汙水處理廠、水文水利、養(yang) 殖漁業(ye) 、大學和科研研究所，環保研究機構等。

葉綠素a測定儀(yi) 的使用方法（以分光光度法為(wei) 例）

1、水樣的采集

一般使用有機玻璃采水器或其他適當的采樣器采集水麵下0.5m水樣，湖泊、水庫根據需要可進行分層采樣或混合采樣，采樣體(ti) 積為(wei) 1L或500ml。如果水樣中含沉降性固體(ti) （如泥沙等），應將水樣搖勻後倒入2L量筒，避光靜置30min，取水麵下5cm水樣，轉移至采樣瓶。在每升水樣中加入1ml碳酸鎂懸濁液，以防止酸化引起色素溶解。

2、製備水樣

在過濾裝置上裝好玻璃纖維濾膜。根據水體(ti) 的營養(yang) 狀態確定取樣體(ti) 積，具體(ti) 可以參考過濾水樣體(ti) 積，用量筒量取一定體(ti) 積的混勻水樣，進行過濾，最後用少量蒸餾水衝(chong) 洗濾器壁。

3、研磨

將樣品濾膜放置於(yu) 研磨裝置中，加入3ml-4ml丙酮溶液，研磨至糊狀。補加3ml-4ml丙酮溶液，繼續研磨，並重複1-2次，保證充分研磨5min以上。將完全破碎後的細胞提取液轉移至玻璃刻度離心管中，用丙酮溶液衝(chong) 洗研缽及研磨杵，一並轉入離心管中，定容至10ml。

4、浸泡提取

將離心管中的研磨提取液充分振蕩混勻後，用鋁箔包好，放置於(yu) 4℃避光浸泡提取2h以上，不超過24h。在浸泡過程中要顛倒搖勻2-3次。

5、離心

將離心管放入離心機，以相對離心力1000×g（轉速 3000 r/min～4000 r/min）離心10min。然後用針式濾器過濾上清液得到葉綠素a的丙酮提取液（試樣）待測。

6、水樣測定

將試樣移至比色皿中，以丙酮溶液為(wei) 參比溶液，葉綠素a測定儀(yi) 於(yu) 波長750nm、664nm、647nm、630nm處測量吸光度。750nm波長處的吸光度應小於(yu) 0.005，否則需重新用針式濾器過濾後測定。最後水樣中葉綠素a的質量濃度可以按照相應公式進行計算得出。